根據(jù)《獸藥管理條例》規(guī)定，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部組織制定了清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）檢查方法，現(xiàn)予發(fā)布，自發(fā)布之日起執(zhí)行。

 

　　農(nóng)業(yè)農(nóng)村部將加強(qiáng)相關(guān)獸藥產(chǎn)品監(jiān)督抽檢力度，對(duì)發(fā)現(xiàn)的非法添加行為，按照獸藥嚴(yán)重違法行為從重處罰情形嚴(yán)厲查處。

 

　　附件：清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）檢查方法

 

　　農(nóng)業(yè)農(nóng)村部

 

　　2024年6月17日

 

　　附件

 

　　清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）檢查方法

 

　　1 適用范圍

 

　　1.1 本方法適用于清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）的檢查。

 

　　1.2 用于其他獸藥制劑中非法添加三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）檢查時(shí)，需進(jìn)行空白試驗(yàn)和檢測(cè)限測(cè)定。

 

　　2 檢查方法

 

　　照高效液相色譜法（《中國(guó)獸藥典》二部附錄0512）測(cè)定。

 

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)  用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（Thermo Hypersil Gold C18（100mm×2.1mm，1.9 μm或效能相似的色譜柱）；以甲醇-50 mmol/L甲酸銨溶液（20:80）為流動(dòng)相，流速為每分鐘0.3 ml；柱溫為30℃；二極管陣列檢測(cè)器，采集波長(zhǎng)范圍為200~400 nm，分辨率為1.2 nm，記錄246 nm波長(zhǎng)處的色譜圖。供試品溶液中三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）色譜峰與相鄰色譜峰的分離度應(yīng)符合要求。

 

　　測(cè)定法  取供試品10片，研細(xì)，稱取1.0 g，置50 ml離心管中，加提取液[0.1 mol/L鹽酸溶液-乙腈（1:1）]20 ml，渦旋混勻，振搖20 分鐘，離心（每分鐘9000轉(zhuǎn)）5 分鐘；取上清液1.0 ml，置100 ml量瓶中，用0.1%甲酸溶液稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，作為供試品溶液。另取三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）對(duì)照品適量，用0.1%甲酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含10 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5 ?l，分別注入液相色譜儀，同時(shí)記錄色譜圖和光譜圖。必要時(shí)，可調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛?，使兩者峰面積接近。通過(guò)與對(duì)照品溶液色譜圖保留時(shí)間、光譜圖的對(duì)比，確定供試品中是否含有三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）。

 

　　3 結(jié)果判定

 

　　3.1供試品溶液色譜圖中如出現(xiàn)與三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）對(duì)照品色譜圖中保留時(shí)間一致的色譜峰（差異不大于±5%），且為單一物質(zhì)峰；在規(guī)定的采集波長(zhǎng)范圍內(nèi)，兩者紫外光譜圖匹配，且最大吸收波長(zhǎng)一致（差異不大于±2nm），判定為檢出三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）。

 

　　3.2 供試品溶液色譜圖中峰保留時(shí)間與三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）相同，但峰面積小于檢測(cè)限峰面積，判定為未檢出三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）。

 

　　4 檢測(cè)限

 

　　本方法檢測(cè)限為0.4 g/kg。

 

　　附

 

　　1.三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）

　　C₁₂H₁₃N₅O₄      291.26

 

　?。?R,3R,4S,5R）-2-（4-氨基吡咯并[2,1-f][1，2，4]三嗪-7-基）-3,4-二羥基-5-（羥甲基）四氫呋喃-2-甲腈

 

　　2.三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）對(duì)照品色譜圖

　　3.三磷酸核苷競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（GS-441524）對(duì)照品光譜圖

　　附件下載：

 

　　   中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第801號(hào).ofd