近日,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所畜產(chǎn)品質(zhì)量安全控制與溯源創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)提出了一種基于核酸免擴(kuò)增的分子雜交試紙條定量分析策略,成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)乳品成分的準(zhǔn)確定量檢測(cè)。相關(guān)研究成果發(fā)表在《生物傳感與生物電子(Biosensors and Bioelectrnics)》。
摻假和欺詐行為的嚴(yán)重程度將直接影響企業(yè)的非法所得,摻假的嚴(yán)重程度是法律量刑時(shí)考慮的重要因素。核酸因其良好的特異性和熱穩(wěn)定性,在加工乳制品的檢測(cè)中應(yīng)用廣泛。然而,基于核酸擴(kuò)增的檢測(cè)方法多為定性檢測(cè),且操作繁瑣,難以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定量分析。
該研究創(chuàng)新性地提出了一種基于膠體金側(cè)流層析試紙條的免核酸擴(kuò)增乳品成分定量檢測(cè)方法。以乳品中含量豐富、穩(wěn)定且種屬特異的線粒體DNA作為檢測(cè)靶標(biāo),設(shè)計(jì)單鏈DNA探針與其雜交。研究團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了一種類環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增的方法,通過(guò) Bst 酶的解旋和DNA聚合功能,結(jié)合雜交緩沖液,實(shí)現(xiàn)了靶標(biāo)DNA雙鏈的解旋和探針與靶標(biāo)DNA單鏈的高效雜交,最大程度地減少了靶標(biāo)互補(bǔ)鏈與DNA探針之間的競(jìng)爭(zhēng),有效克服了靶標(biāo)DNA鏈互補(bǔ)鏈對(duì)檢測(cè)的影響,提高了雜交的特異性和效率。同時(shí),該方法能夠有效的避免氣溶膠污染的風(fēng)險(xiǎn),并可實(shí)現(xiàn)對(duì)乳品的準(zhǔn)確定量檢測(cè)。該技術(shù)能夠檢測(cè)到乳品中低至1%(v/v)含量的牛奶,結(jié)合便攜式試紙條掃描儀使用時(shí),能夠精確分析牛奶含量。這種無(wú)需擴(kuò)增的核酸檢測(cè)方法為乳品行業(yè)提供了一種高效且準(zhǔn)確的乳品成分定量檢測(cè)手段,為確保乳品質(zhì)量和真?zhèn)翁峁┝丝煽康募夹g(shù)支持。
該研究得到了國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程等項(xiàng)目的支持。
原文鏈接:https://doi.org/10.1016/j.bios.2024.116140
