南湖新聞網(wǎng)訊(記者 曉宣)甘藍(lán)型油菜是我國(guó)最重要的油料作物之一。研究表明,在遺傳背景接近的情況下,黃籽油菜較黑籽油菜種子含油量更高,而木質(zhì)纖維素含量更低,故在甘藍(lán)型油菜育種中備受青睞。然而,目前已克隆的絕大多數(shù)黃籽基因均為隱性基因,這極大限制了甘藍(lán)型油菜黃籽品種的培育。
1月4日,張椿雨教授團(tuán)隊(duì)聯(lián)合華中科技大學(xué)栗茂騰教授團(tuán)隊(duì)在Science Advances期刊發(fā)表了題為A rare dominant allele DYSOC1 determines seed coat color and improves seed oil content in Brassica napus的研究論文。該研究通過(guò)eQTL分析與QTL精細(xì)定位聯(lián)合分析,成功從黃籽甘藍(lán)型油菜品系N53-2中鑒定并克隆了一個(gè)顯性黃籽基因DYSOC1(dominant gene of yellow seed coat color and improved seed oil content 1)。遺傳后代表型分析和轉(zhuǎn)基因后代分析顯示,該基因在使種皮種子變黃的同時(shí),也顯著提高了含油量。據(jù)悉,這是我國(guó)學(xué)者在該期刊上發(fā)表的關(guān)于甘藍(lán)型油菜的首篇論文,該研究為黃籽種質(zhì)資源的創(chuàng)制和甘藍(lán)型油菜分子育種奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ),具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值和應(yīng)用前景。
研究團(tuán)隊(duì)首先通過(guò)雜交試驗(yàn)確認(rèn)了N53-2中包含顯性黃籽基因,并通過(guò)對(duì)KN DH群體進(jìn)行eQTL分析,在ChrA09染色體末端鑒定到一個(gè)與種子含油量、種皮顏色和種子木質(zhì)纖維素含量主效QTL共定位的trans-eQTL熱點(diǎn)區(qū)。在確定關(guān)鍵位點(diǎn)后,研究團(tuán)隊(duì)基于前期初步定位所獲得QTL位點(diǎn)基礎(chǔ)上,通過(guò)高世代近等基因系構(gòu)建和QTL精細(xì)定位,將該主效QTL區(qū)間縮小至70 kb。進(jìn)而,結(jié)合近等基因系不同單倍型株系的轉(zhuǎn)錄組和親本間候選基因序列差異,獲得了候選基因BnaA09g44670D,根據(jù)主效QTL的效應(yīng),將該基因命名為DYSOC1。
轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果表明,在黑籽甘藍(lán)型油菜中回補(bǔ)DYSOC1在種皮變黃和含油量顯著提高,最高可增加10%以上,同時(shí),種子木質(zhì)纖維素含量、原花青素含量、種皮厚度和皮殼率顯著下降。而在黃籽油菜N53-2中敲除DYSOC1則獲得相反的表型。進(jìn)一步分析表明,DYSOC1對(duì)轉(zhuǎn)基因后代株系的形態(tài)和產(chǎn)量等相關(guān)性狀無(wú)明顯影響。DYSOC1在種皮中高度特異性表達(dá),并有效抑制苯丙烷代謝途徑和黃酮類化合物的合成,從而顯著減少原花青素和木質(zhì)纖維素含量,使種皮更薄且呈現(xiàn)黃色。群體單倍型分析表明,DYSOC1尚未在甘藍(lán)型油菜育種中得到廣泛應(yīng)用。通過(guò)將N53-2和甘藍(lán)型油菜黑籽品種中雙11雜交,雜種后代中帶有DYSOC1單倍型的株系在種皮變黃的同時(shí),種子含油量顯著提高了4%以上,這進(jìn)一步驗(yàn)證了該基因的直接利用價(jià)值。
根據(jù)上述研究結(jié)果,研究團(tuán)隊(duì)提出,可通過(guò)不同育種策略利用DYSOC1 進(jìn)行高含油量甘藍(lán)型油菜品種創(chuàng)制,以適應(yīng)不同種植環(huán)境需要。在第一種策略中,F(xiàn)1雜交種表現(xiàn)為黃色種皮,因而可具有更快的萌發(fā)速度;而在第二種策略中,F(xiàn)1雜交種表現(xiàn)為黑色種皮,可具有更強(qiáng)的抗逆性。這兩種育種策略均能實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)黃籽、種子高含油量、以及低木質(zhì)纖維素含量的高品質(zhì)油菜籽的目標(biāo)。
該研究不僅為黃籽高含油量、低木質(zhì)纖維素含量甘藍(lán)型油菜育種提供了一種新的基因資源,還展示了多組學(xué)分析結(jié)合eQTL和QTL精細(xì)定位技術(shù)在關(guān)鍵農(nóng)藝性狀遺傳解析與候選基因鑒定方面的潛力,為未來(lái)作物遺傳改良和精準(zhǔn)育種提供了技術(shù)經(jīng)驗(yàn)。
華中科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院博士研究生李懷鑫和吳明麗為該文第一作者,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院張椿雨教授和華中科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院栗茂騰教授為通訊作者。該研究得到了國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃和國(guó)家自然科學(xué)基金的資助。
