OECD TG420-固定劑量法

（HDP）

OECD TG423-分級試驗法

（ATC）

OECD TG425-上下移位法

（UDP）

方法的發(fā)展

1984年英國毒理協(xié)會提出，OECD 2001年作為指南TG420

1990年Sumiey提出，OECD于1996年采用，于2001年更新列為指南TG423。目前歐洲使用此方法比較普遍。

1948年Dixon和Mood首次提出，OECD于1998年采用，2006年更新列為指南TG425。

原理簡介

固定5,50,300,2000mg/kg四個劑量組，（必要時可以增加5000mg/kg)，依次使用同一性別的動物（一般為雌性），經(jīng)口染毒。根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果，確定會發(fā)生毒性反應(yīng)，但不產(chǎn)生嚴(yán)重的毒性反應(yīng)或死亡的劑量作為起始劑量進行試驗，再根據(jù)觀察的結(jié)果調(diào)整毒性劑量，當(dāng)出現(xiàn)以下情況時終止試驗：1，當(dāng)出現(xiàn)明顯的毒性反應(yīng)或已確認(rèn)不多于1只動物死亡；2，最高劑量未出現(xiàn)毒性反應(yīng)；3，最低劑量動物出現(xiàn)死亡。

試驗分為若干階段，每階段使用3只動物，最多6只動物。已設(shè)計四個固定的劑量5,50,300,2000mg/kg，選定一個初始劑量進行試驗，根據(jù)試驗結(jié)果（動物死亡或者瀕臨死亡的動物數(shù)量）來判定是否進行下一步試驗或者終止試驗。有三種可能的結(jié)果：1，無需進一步試驗即可分級；2，同一劑量水平再做3只動物；3，在高一級或低一級劑量水平另做三只動物。

由限度試驗和主試驗組成，限度試驗分為2000mg/kg和5000mg/kg兩個劑量水平，用于受試物毒性較小的情況，兩種劑量限度試驗過程有細微差別，但最多只用5只動物。主試驗是一個預(yù)先設(shè)定的染毒程序，每次染毒1只動物，有1只動物染毒后的反應(yīng)決定第2只動物接受染毒的劑量，若動物存活，第2只動物給予高一級劑量，若第1只動物死亡或出現(xiàn)瀕臨死亡的狀態(tài)，則第2只動物給予低一級別劑量。在對每只染毒動物觀察48小時候，可以決定是否對下一只動物染毒以及確定染毒劑量。當(dāng)滿足停止試驗的標(biāo)準(zhǔn)時，可以結(jié)束試驗。

每次使用動物數(shù)量

5-7只

平均7只

6-9只

每次試驗動物死亡數(shù)量

1只

2-3只

2-3只

每劑量水平使用動物數(shù)

5只

3只

1只

全部試驗最多所需動物數(shù)

20只

12只

15只

實驗動物數(shù)

只需10～20只動物（預(yù)試一般不超過5只動物；主實驗：每個劑量最少用10只動物，雌雄各半）

6-12只動物 （2000mg/kg 限量試驗:6只動物; 5000mg/kg: 3只動物; 主實驗:最多12只） 

限量試驗: 最多5只； 主實驗: 通常4-6只，最多15只

劑量選擇

限量實驗: 2000 or 5000mg/kg bw; 主實驗: 5,50, 300, 2000mg/kg bw

限量實驗: 2000 or 5000mg/kg bw;主實驗: 5,50, 300, 2000mg/kg bw

限量實驗: 2000 or 5000mg/kg bw;  1.75 、5.5 、17.5 、55 、175 、550 、2000 mg/kg （或有特殊要求時1.75 、5.5 、17.5 、55 、175 、550 、1750 、5000 mg/kg

觀察的指標(biāo)

不以動物死亡作為研究的終點，而是以毒性發(fā)展的臨床體征的觀察作為終點，對化學(xué)品急性毒性進行分類。

用于危害評估危害分類，以及危害度評價，它是以動物死亡作為試驗終點的分階段試驗法。

以動物的死亡作為研究的重點，同時進行毒性表現(xiàn)的觀察。

LD50的值和置信度

不能精確估計LD50的值和LD50的置信限，但是可以粗略的估計LD50的范圍。同樣對于死亡劑量反應(yīng)曲線的斜率和置信限也無法估計。

不能精確估計LD50的值和LD50的置信限，但是可以根據(jù)提供的數(shù)據(jù)使用最大相似法進行計算。該方法也適用于死亡劑量反應(yīng)曲線的斜率和置信限的估計。

不但可以進行毒性表現(xiàn)的觀察，還可以估算LD50及其可信度，適用于能引起動物快速死亡的受試物。不適用于有遲發(fā)型毒性反應(yīng)特點的物質(zhì)。

應(yīng)用情況

采用這種方法的實驗室較少

普遍使用，大部分國家接受

美國、中國推薦使用

特點

固定劑量、觀察動物反應(yīng),不以死亡為依據(jù),而且按毒性癥狀來判斷該物質(zhì)的危險程度

每階段3只動物，2-4階段即可判定急性毒性。死亡動物數(shù)一般不超過3只。

節(jié)省實驗動物，同時，不但可以進行毒性表現(xiàn)的觀察，還可以估算LD50 及其可信限。死亡動物數(shù)一般不超過3只。