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    江南大學(xué)饒志明教授團(tuán)隊(duì)在ACS Synthetic Biology發(fā)表協(xié)調(diào)操縱子中多基因表達(dá)提高枯草芽孢桿菌的核黃素產(chǎn)量的封面文章

    放大字體  縮小字體 時(shí)間:2022-06-16 08:28 來源:江南大學(xué) 作者: 尤甲甲   原文:
    核心提示:近期,江南大學(xué)饒志明教授團(tuán)隊(duì)在高效合成核黃素方面取得重要進(jìn)展,研究成果“Increased Production of Riboflavin by Coordinated Expression of Multiple Genes in Operons inBacillus subtilis”以封面文章形式正式發(fā)表于ACS Synthetic Biology(DOI: 10.1021/acssynbio.1c00640)。
      近期,江南大學(xué)饒志明教授團(tuán)隊(duì)在高效合成核黃素方面取得重要進(jìn)展,研究成果“Increased Production of Riboflavin by Coordinated expression of Multiple Genes in Operons inBacillus subtilis”以封面文章形式正式發(fā)表于ACS Synthetic Biology(DOI: 10.1021/acssynbio.1c00640)。
     
      核黃素又叫VB2,廣泛應(yīng)用于制藥工業(yè)以及作為食品和飼料添加劑。枯草芽孢桿菌是目前最具競(jìng)爭(zhēng)力的核黃素生產(chǎn)者,已廣泛應(yīng)用于核黃素的商業(yè)生產(chǎn)工藝中。在枯草芽孢桿菌中,前體供應(yīng)不足是限制核黃素產(chǎn)量的主要因素。因此,平衡核黃素合成的前體物質(zhì)供應(yīng)是提高核黃素的有效途徑。
     
      饒志明團(tuán)隊(duì)開發(fā)了協(xié)調(diào)操縱子中多基因表達(dá)的TIGR(基因間可協(xié)調(diào)文庫(kù))系統(tǒng),該系統(tǒng)基于基因間mRNA工程調(diào)節(jié)mRNA的穩(wěn)定性和二級(jí)結(jié)構(gòu)來調(diào)節(jié)基因表達(dá)。在核黃素合成過程中,核酮糖-5磷酸是核黃素合成途徑和嘌呤途徑的共同前體,因此合理分配核酮糖-5磷酸的代謝流對(duì)提高核黃素前體供應(yīng)至關(guān)重要。因此,本研究利用TIGR系統(tǒng)協(xié)調(diào)核黃素合成關(guān)鍵基因的表達(dá)水平,進(jìn)而提高核黃素的產(chǎn)量。首先,構(gòu)建含有TIGR的雙報(bào)告基因操縱子文庫(kù),并確定TIGR對(duì)兩個(gè)報(bào)告基因表達(dá)的調(diào)控作用,TIGR序列可協(xié)調(diào)雙報(bào)告基因在枯草芽孢桿菌中的表達(dá)比例范圍在70倍以上。接下來,使用TIGR文庫(kù)調(diào)節(jié)核黃素合成關(guān)鍵基因zwf、ribBA和ywlf的表達(dá),以增加核黃素生物合成的細(xì)胞內(nèi)前體供應(yīng)。根據(jù)核黃素具有熒光的特性,高通量篩選最佳組合突變組合。篩選得到的最佳工程菌株在搖瓶發(fā)酵過程中,核黃素產(chǎn)量達(dá)到2.7 g/L,提高64.35%;在5 L分批補(bǔ)料發(fā)酵中,核黃素產(chǎn)量達(dá)到11.77 g/L,提高了59.27%。由此表明,TIGR系統(tǒng)用于協(xié)調(diào)操縱子內(nèi)關(guān)鍵基因表達(dá)可有效提高目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)量。
     
      饒志明教授和楊套偉副教授為論文的通訊作者,我校博士后尤甲甲為第一作者。上述研究得到了國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2021YFC2100900)、國(guó)家自然科學(xué)基金(No.32071470)等資助。
    日期:2022-06-16
     
     
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