食用油中脂肪酸組成種類豐富，但由于脂肪酸的鏈長(zhǎng)、不飽和度、幾何構(gòu)型、雙鍵位置和官能團(tuán)不同，使得部分脂肪酸分離檢測(cè)較為困難。目前檢測(cè)食品中脂肪酸的方法主要有氣相色譜法、液相色譜法、銀離子薄層色譜法、紅外光譜法、質(zhì)譜法、毛細(xì)管電泳法等。其中，氣相色譜由于分離效率高、檢測(cè)限低而廣為應(yīng)用。因此急需進(jìn)一步提高現(xiàn)有氣相色譜高效分離檢測(cè)方法，建立脂肪酸的高通量、精準(zhǔn)識(shí)別快檢技術(shù)。

 

　　本研究的擬建立一種高通量、高靈敏度、低檢測(cè)限的同時(shí)檢測(cè)分離多種脂肪酸的氣相色譜方法，并對(duì)南眉籽油在熱加工過(guò)程中脂肪酸進(jìn)行評(píng)價(jià)，為其工業(yè)化應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

 

　　02

 

　　采用CP Sil 88氣相色譜柱（100 m×0.25 mm×0.2 μm），通過(guò)不斷調(diào)整程序升溫的柱溫、分流比、升溫速率等，確定分離72種脂肪酸甲酯（FAME）效果最優(yōu)的氣相色譜方法，并檢測(cè)確定72種脂肪酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限（LOD）、定量限（LOQ）、日內(nèi)精密度和日間精密度RSD值。

 

　　采用優(yōu)化的氣相色譜方法檢測(cè)分析180、220和230℃下加熱8-24 h的南眉籽油脂肪酸的變化情況，同時(shí)檢測(cè)新鮮南眉籽油的色澤、貨架期、水分及揮發(fā)物等。南眉籽油采用73℃預(yù)熱3 h后，50℃、41MPa壓榨1.7 h制備得到。

 

 

　　經(jīng)過(guò)不斷優(yōu)化試驗(yàn)后確定氣相色譜條件為：進(jìn)樣口溫度230℃；進(jìn)樣量1μL；分流比10:1；氮?dú)饬魉?0.6 ml/min；恒定線速度模式；色譜柱初始溫度為60℃，保持5 min，以25℃/min的加熱速率升至160℃，保持4 min，以2℃/min升至225℃，保持50 min，再以1℃/min升至230℃，保持5 min。檢測(cè)器為：氫火焰離子化檢測(cè)器FID；檢測(cè)器溫度230℃。

 

　　使用本方法得到72種脂肪酸氣相色譜圖（圖1），包括36種不飽和脂肪酸、22種飽和脂肪酸、12種反式脂肪酸和2種共軛脂肪酸。各脂肪酸的儀器響應(yīng)值與濃度呈良好的線性相關(guān)，線性關(guān)系基本都高于0.999，日內(nèi)精密度RSD值控制在0.57-9.81％，日間精密度的RSD值控制在0.47-9.87％，檢出限和定量限在0.000084-0.001276g/100g和0.000289-0.004263g/100g之間，穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性好，能夠?qū)崿F(xiàn)脂肪酸的精準(zhǔn)識(shí)別。檢測(cè)種類比國(guó)標(biāo)GB5009.168-2016多35種，日內(nèi)日間精密度遠(yuǎn)低于國(guó)標(biāo)方法，檢出限分別只有國(guó)標(biāo)方法十分之二。

 

　　圖1 72種脂肪酸甲酯的氣相色譜圖

 

　　另外，本方法還能實(shí)現(xiàn)26種脂肪酸甲酯異構(gòu)體的高效分離（圖2），包括21種反式脂肪酸、3種順反共軛亞油酸和2種反反共軛亞油酸。相比國(guó)標(biāo)GB5009.257-2016，檢測(cè)種類多12種。

 

 

 

　　運(yùn)用優(yōu)化的氣相色譜方法，分析了加熱過(guò)程中南眉籽油的脂肪酸變化。南眉籽油共有12種脂肪酸，其中主要為亞油酸（51.6%）、亞麻酸（20.2%）和油酸（12.7%）等。南眉籽油加熱后，不飽和脂肪酸首先生成單反式脂肪酸，再生成雙反式脂肪酸，最后生成三反式脂肪酸。隨著加熱溫度的升高和加熱時(shí)間的延長(zhǎng)，反式脂肪酸的含量和種類不斷增加（圖3）。同時(shí)新鮮南眉籽油的色澤、過(guò)氧化值、酸價(jià)、貨架期、水分及揮發(fā)物全都滿足植物油國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB 271-2018），表明其具有良好品質(zhì)。

 

　　圖3 加熱新鮮南眉籽油中脂肪酸的轉(zhuǎn)化

 

　　04

 

　　本研究建立了一種72種C3-C24系列脂肪酸的檢測(cè)方法，該方法具有高通量、準(zhǔn)確性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，尤其在油酸、亞油酸和亞麻酸等方面的檢測(cè)效果好。運(yùn)用優(yōu)化的氣相色譜方法探究了南眉籽油在加熱過(guò)程中脂肪酸的變化，并為日常生活中脂肪酸的精準(zhǔn)調(diào)控提供理論依據(jù)。